РОЗРОБЛЕННЯ ТА ВАЛІДАЦІЯ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧНОЇ МЕТОДИКИ ВИЗНАЧЕННЯ ШВИДКОСТІ ОКИСНЕННЯ ДОФАМІНУ В МОДЕЛЬНІЙ ХІМІЧНІЙ СИСТЕМІ

Анотація

Хвороба Паркінсона посідає друге місце за поширеністю серед нейродегенеративних розладів. Це захворювання викликане прогресувальним пошкодженням дофамінергічних нейронів у мозку, що призводить до зменшення кількості дофаміну – нейромедіатора, який відповідає за регуляцію рухових функцій. Повідомляється, що дофамін є нестабільною молекулою і може піддаватися процесам окиснення, що призводить до зниження його рівня і, відповідно, до виникнення рухових розладів. До того ж при окисненні цього нейромедіатора утворюється велика кількість реактивних і токсичних побічних продуктів, які пошкоджують нейронні клітини. Зважаючи на те, що окиснення дофаміну відіграє значущу роль у розвитку та прогресуванні хвороби Паркінсона, перспективними є дослідження, спрямовані на вивчення кінетичних закономірностей цього процесу. Мета роботи – розробити та валідувати спектрофотометричну методику для вивчення кінетики окиснення дофаміну в контрольованих умовах in vitro. Запропонована спектрофотометрична методика визначення кінетики окиснення дофаміну в модельній хімічній системі базується на вимірюванні збільшення оптичного поглинання продуктів окиснення дофаміну, переважно дофамінохрому, при довжині хвилі 500 нм залежно від часу. Проведено валідацію розробленої методики за такими валідаційними параметрами, як специфічність, лінійність, прецизійність та робастність. Згідно з отриманими результатами процедури валідації підтверджено, що довжина хвилі 500 нм є специфічною для аналізу. Доведено, що методика є лінійною, адже коефіцієнт кореляції в інтервалі концентрацій дофаміну 80–120 % становить 0,995. Прецизійність методики підтверджено на рівні збіжності та відтворюваності. Доведено, що зміна температури проведення дослідження та довжини хвилі детектора суттєво не впливають на результати методики, що підтверджує робастність. Отже, розроблена спектрофотометрична методика дає змогу отримувати правильні й відтворювані результати визначення кінетики окиснення дофаміну, оскільки всі обрані валідаційні характеристики відповідають критеріям прийнятності. Розроблена методика створює основи для досліджень впливу різних активних фармацевтичних інгредієнтів на процес окиснення дофаміну, що, відповідно, сприятиме розробці нових лікарських засобів для лікування та профілактики хвороби Паркінсона.